ABI_7500熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀(yi)

壹(yi)、ABI_7500熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)主(zhu)要(yao)特(te)點(dian)：  

（1）五(wu)色(se)熒光檢測,應(ying)用(yong)更(geng)廣(guang)泛全(quan)面(mian)，包括：基因表(biao)達(da)分(fen)析，病(bing)原體(ti)定(ding)量(liang)分(fen)析，SNP基因型分(fen)析以(yi)及以(yi)陽(yang)性內對(dui)照為(wei)基礎(chu)的陽性/陰(yin)性結果(guo)判(pan)定(ding)。  

（2）新型光路設計(ji)支持(chi)更多(duo)的熒光(guang)標記(ji)檢測，包括：FAM™/SYBR®GreenI,VIC®/JOE,NED™/TAMRA™/Cy3®,ROX™/TexasRed®,和(he)Cy5®。  

（3）更好的激發(fa)光源(yuan)設(she)計(ji)使長(chang)波長(chang)紅(hong)色熒(ying)光(guang)的檢測靈(ling)敏度大大提高，強(qiang)大而靈(ling)活(huo)的反應(ying)板設(she)置(zhi)指(zhi)南軟件(jian)使反應(ying)板設(she)置(zhi)非常方便(bian)，先(xian)進(jin)的實驗(yan)結果(guo)顯(xian)示(shi)與自(zi)動分(fen)析工(gong)具使實驗(yan)數(shu)據的分(fen)析處理(li)更簡單(dan)直觀。  

（4）新型半(ban)導體(ti)熱循(xun)環系統(tong)支(zhi)持96孔板(ban)和(he)單(dan)壹(yi)0.2ml反應(ying)管。  

（5）將來(lai)可(ke)以(yi)升級至(zhi)超速定(ding)量(liang)PCR反應(ying)模(mo)式(shi)，大大縮(suo)短定(ding)量(liang)PCR反應(ying)時間(jian)體(ti)積小(xiao)，采用(yong)手(shou)提電(dian)腦或臺式(shi)電(dian)腦，適用(yong)於(yu)任何空間(jian)的實驗(yan)室(shi)。  

二(er)、ABI_7500熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)主(zhu)要(yao)應(ying)用(yong):  

（1）實時定(ding)量(liang)PCR應(ying)用(yong)廣(guang)泛，包括基於(yu)相(xiang)對(dui)定(ding)量(liang)分(fen)析的基因表(biao)達(da)分(fen)析，以(yi)標準曲(qu)線為基礎(chu)的病(bing)原體(ti)定(ding)量(liang)分(fen)析，定(ding)性的PCR擴增後(hou)核酸序列的SNP基因型分(fen)析，以(yi)及以(yi)陽(yang)性內對(dui)照為(wei)基礎(chu)的陽性/陰(yin)性結果(guo)判(pan)定(ding)快(kuai)速(su)熱(re)循(xun)環  

（2）7500型實時熒光定(ding)量(liang)PCR系(xi)統(tong)的標準模(mo)式(shi)采用(yong)25-100微升反應(ying)體(ti)積，可以(yi)采用(yong)96孔(kong)板或單(dan)管/8聯管進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)反應(ying)。  

（3）另(ling)外(wai)7500還(hai)可(ke)以升級為(wei)快(kuai)速熱循(xun)環樣品(pin)基座(zuo)，該(gai)升級為(wei)選購(gou)件，由(you)AB公司(si)工程師負(fu)責(ze)安(an)裝(zhuang)。快(kuai)速(su)熱循(xun)環樣品(pin)基座(zuo)采用(yong)新型96孔反應(ying)板，這(zhe)種(zhong)反應(ying)板的管內液體(ti)上方的空間(jian)較小(xiao)，可(ke)以支持5-30微升反應(ying)體(ti)積的實驗(yan)。  

（4）采用(yong)樣(yang)品基座(zuo)升級後(hou)的7500，新型96孔反應(ying)板和(he)新型快速熱循(xun)環定(ding)量(liang)PCR預(yu)混(hun)試(shi)劑(ji)，實(shi)時(shi)定(ding)量(liang)PCR實(shi)驗(yan)可以(yi)在(zai)40分(fen)鐘內(nei)完(wan)成，實驗(yan)效果(guo)與標準2小(xiao)時(shi)模(mo)式(shi)**。  

三、實時(shi)定(ding)量(liang)PCR系(xi)統(tong)分(fen)析軟(ruan)件:  

（1）7500型實時熒光定(ding)量(liang)PCR系(xi)統(tong)軟件采用(yong)WindowsXP®操作系(xi)統，進(jin)行(xing)儀(yi)器(qi)控制(zhi)，數(shu)據收(shou)集和(he)數(shu)據分(fen)析，軟(ruan)件功(gong)能(neng)強(qiang)大，界面友(you)好(hao)，包括如下特(te)色：  

反應(ying)板設(she)置(zhi)指(zhi)南，使實驗(yan)設計(ji)非常簡單(dan)，即(ji)使是(shi)復雜(za)的多重定(ding)量(liang)實(shi)驗(yan)也是(shi)如此(ci)。  

擴增反應(ying)曲線的實時(shi)監測  

自(zi)動設(she)定(ding)熒(ying)光(guang)基線，自(zi)動計(ji)算(suan)熒(ying)光(guang)閾值使實驗(yan)結果(guo)分(fen)析大大簡化  

采用(yong)標準曲(qu)線進(jin)行(xing)靶基因的定(ding)量(liang)  

基因表(biao)達(da)相(xiang)對(dui)定(ding)量(liang)軟(ruan)件(jian)提供強(qiang)大的結果(guo)分(fen)析顯(xian)示(shi)，可以(yi)自(zi)動將(jiang)多(duo)達(da)10塊96孔(kong)板基因表(biao)達(da)實(shi)驗(yan)的數(shu)據同時分(fen)析。

（2）自(zi)動去除無(wu)關項(xiang)數(shu)據，該(gai)軟(ruan)件(jian)為(wei)選購(gou)件：

自(zi)動SNP分(fen)型軟件以直觀的圖表輸(shu)出(chu)分(fen)型結果(guo)並(bing)自(zi)動進(jin)行(xing)分(fen)型質(zhi)量(liang)評(ping)分(fen)  

解離(li)曲(qu)線數(shu)據采集(ji)操作簡單(dan)觀察方便(bian)，可(ke)以在(zai)儀(yi)器(qi)運行(xing)時(shi)觀察解離(li)曲(qu)線數(shu)據  

觀察實時擴增曲(qu)線時可以非常方便(bian)的標定(ding)所(suo)對(dui)應(ying)的樣品(pin)孔位(wei)置(zhi)  

光源(yuan)使用(yong)時(shi)間監測及儀器(qi)系(xi)統自(zi)我診(zhen)斷(duan)程序  

四(si)、熒光(guang)信號檢測:  

（1）ABI7500快速型實時熒光定(ding)量(liang)PCR系(xi)統(tong)的全(quan)部(bu)96個(ge)樣(yang)品(pin)孔(kong)采用(yong)同壹(yi)鹵(lu)鎢(wu)燈作為(wei)光源(yuan)，鹵(lu)鎢(wu)燈(deng)光(guang)通(tong)過(guo)五(wu)色(se)光源(yuan)濾光片(pian)後(hou)激(ji)發每壹(yi)個(ge)分(fen)析樣(yang)品。鹵(lu)鎢(wu)燈(deng)光(guang)源(yuan)增(zeng)加(jia)光(guang)源(yuan)濾光片(pian)後(hou)改(gai)善了(le)長(chang)波長(chang)紅(hong)色熒(ying)光(guang)標記(ji)的激發(fa)效果(guo)，可(ke)以大大提高紅(hong)色熒(ying)光(guang)檢測的靈(ling)敏度和(he)定(ding)量(liang)分(fen)析的準確(que)性。  

（2）激發後(hou)的熒光(guang)再通(tong)過(guo)五(wu)色(se)熒光濾光片(pian)到(dao)達(da)CCD照(zhao)相(xiang)機(ji)檢測信號。五(wu)色(se)熒光濾光片(pian)能(neng)夠有(you)效地(di)分(fen)辨包括：FAM™/SYBR®GreenI,VIC®/JOE,NED™/TAMRA™/Cy3®,ROX™/TexasRed®和(he)Cy5®在(zai)內(nei)的多種(zhong)熒(ying)光染(ran)料(liao)。  

五(wu)、介(jie)紹：  

（1）ABI7500快速型實時定(ding)量(liang)PCR儀(yi)是(shi)特(te)異性靶基因檢測與定(ding)量(liang)的壹(yi)體(ti)化平臺。7500將(jiang)PCR熱(re)循(xun)環，熒光(guang)檢測和(he)各(ge)種(zhong)應(ying)用(yong)分(fen)析軟(ruan)件結合在(zai)壹(yi)起(qi)，可(ke)以動(dong)態(tai)觀察PCR每壹(yi)循(xun)環各反應(ying)管中PCR擴增產物(wu)逐(zhu)漸增加的情況(kuang)。  

（2）PCR實驗(yan)結束(shu)後(hou)可(ke)以馬上得(de)到定(ding)量(liang)結果(guo)，無(wu)需(xu)凝膠電(dian)泳分(fen)析，無(wu)需(xu)純(chun)化PCR產物(wu)，無(wu)需(xu)進(jin)行(xing)任何實驗(yan)操作。

（3）7500型實時熒光定(ding)量(liang)PCR儀(yi)采用(yong)96孔(kong)反應(ying)板或(huo)單(dan)個(ge)及(ji)8聯(lian)管，反應(ying)體(ti)積25-100微升，實驗(yan)可以(yi)在(zai)不(bu)到(dao)2小(xiao)時(shi)內結束(shu)。與其(qi)他(ta)人工(gong)基因定(ding)量(liang)分(fen)析方法(fa)如NorthernblottingorRNase-protectionassays相(xiang)比(bi)，7500型實時熒光定(ding)量(liang)PCR系(xi)統(tong)具有(you)時間(jian)省(sheng)，靈(ling)敏度高(gao)，準確(que)性好和(he)線性範(fan)圍寬(kuan)等優(you)點(dian)。

（4）7500型實時熒光定(ding)量(liang)PCR系(xi)統(tong)由全(quan)球(qiu)實(shi)時(shi)定(ding)量(liang)PCR技(ji)術的美國(guo)應(ying)用(yong)生(sheng)物系統公(gong)司(si)於(yu)2004年1月推(tui)出(chu)，它(ta)質(zhi)量(liang)優(you)異，實(shi)驗(yan)結果(guo)準確(que)可信，性能價(jia)格(ge)比(bi)極(ji)其(qi)*。  

六(liu)、儀(yi)器(qi)技(ji)術指(zhi)標：