PCR技術是壹種體(ti)外快速(su)擴增(zeng)特(te)定(ding)DNA片段(duan)的方法(fa)，通過(guo)特(te)定(ding)的(de)引物和DNA聚合酶，將特(te)定(ding)的(de)DNA片段(duan)在體(ti)外進(jin)行指(zhi)數(shu)級(ji)擴增(zeng)。熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀則(ze)在(zai)此基(ji)礎(chu)上，通過(guo)熒(ying)光信(xin)號的(de)檢(jian)測(ce)，實時(shi)反映(ying)PCR產物的(de)生成量(liang)。

 

　　熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀通常(chang)使用兩(liang)種主(zhu)要的檢(jian)測(ce)方法(fa)：染(ran)料法(fa)和探(tan)針(zhen)法(fa)。染(ran)料法(fa)使用能(neng)夠結合雙鏈(lian)DNA的染(ran)料，當PCR產物生成時(shi)，染(ran)料與雙鏈DNA結合並發出(chu)熒(ying)光，熒(ying)光信(xin)號的(de)強(qiang)度(du)與雙鏈DNA的量(liang)成正比(bi)。探針(zhen)法(fa)則(ze)是(shi)使(shi)用特(te)定(ding)的(de)熒(ying)光標(biao)記(ji)探(tan)針(zhen)，探針(zhen)與PCR產物中(zhong)的(de)特定(ding)序列雜(za)交，當探針(zhen)被(bei)PCR產物切(qie)割時(shi)，熒(ying)光信(xin)號被(bei)釋放(fang)，從而(er)實現對(dui)PCR產物的(de)實(shi)時檢測(ce)。

 

　　熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀在生物研(yan)究中(zhong)具(ju)有廣泛的(de)應(ying)用，包(bao)括但不(bu)限(xian)於以下幾個(ge)方面：

 

　　1.基(ji)因(yin)表達分(fen)析：通過(guo)熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR，可以檢(jian)測(ce)特定(ding)基(ji)因(yin)在細(xi)胞(bao)或(huo)組織(zhi)中(zhong)的(de)表達(da)水(shui)平(ping)，從(cong)而(er)研(yan)究基(ji)因(yin)的功能(neng)和(he)調(tiao)控(kong)機(ji)制。

 

　　2.病(bing)原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)：熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR可用於檢(jian)測(ce)各種病(bing)原(yuan)體(ti)，如(ru)病(bing)毒(du)、細(xi)菌(jun)等(deng)，具(ju)有高(gao)度的(de)特(te)異性和(he)靈(ling)敏(min)度(du)，對(dui)於疾病(bing)的早(zao)期(qi)診斷(duan)和(he)治(zhi)療具(ju)有重(zhong)要意(yi)義(yi)。

 

　　3.基(ji)因(yin)突(tu)變分(fen)析：通過(guo)設(she)計(ji)特(te)定(ding)的(de)引物和探針(zhen)，熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR可用於檢(jian)測(ce)DNA的突(tu)變，如(ru)點(dian)突(tu)變、插(cha)入(ru)或(huo)刪除等(deng)，為遺傳病(bing)的診斷(duan)和(he)研(yan)究提供有力(li)工具(ju)。

 

　　4.藥物(wu)研(yan)發：熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR可用於研(yan)究(jiu)藥物(wu)對(dui)基(ji)因(yin)表達的(de)影響，從而(er)評(ping)估藥物(wu)的(de)療效和副(fu)作(zuo)用。

 

　　5.環境監測(ce)：熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR也可用於環境樣(yang)本中(zhong)微(wei)生物的(de)檢測(ce)和定(ding)量(liang)分(fen)析，如(ru)水(shui)源、土(tu)壤(rang)、空氣(qi)等(deng)。