Bio-Rad_iCycleriQ熒光定量PCR儀作(zuo)為壹(yi)種常(chang)用(yong)的(de)分子(zi)生(sheng)物(wu)學(xue)工(gong)具,近(jin)年(nian)來在基因(yin)表達(da)分析領域發揮(hui)了(le)舉(ju)足(zu)輕重的(de)作(zuo)用(yong)。基因(yin)表達(da)是(shi)生(sheng)物(wu)體(ti)基因(yin)功(gong)能(neng)的(de)重要體(ti)現(xian),通(tong)過(guo)研究基因(yin)表達(da)水平的(de)變(bian)化(hua),科研人員能(neng)夠深(shen)入(ru)了解(jie)基因(yin)在生(sheng)物(wu)體(ti)中(zhong)的(de)作(zuo)用(yong)以及與疾(ji)病(bing)的(de)相關(guan)性。
Bio-Rad_iCycleriQ熒光定量PCR儀正是(shi)滿足(zu)這壹(yi)需求的(de)有(you)效(xiao)工(gong)具。
熒光定量PCR技術(shu),是(shi)在傳統的(de)PCR基礎(chu)上(shang),通(tong)過(guo)加(jia)入(ru)熒光基團(tuan),實時監(jian)測(ce)PCR擴增(zeng)過(guo)程中(zhong)的(de)熒光信號(hao)強(qiang)度(du),從(cong)而(er)實現對特定(ding)基因(yin)表達(da)量(liang)的(de)定(ding)量分析。該技術(shu)具有(you)高(gao)度(du)敏(min)感(gan)、特異(yi)性和準確性,已成(cheng)為(wei)基因(yin)表達(da)分析的(de)金(jin)標(biao)準方(fang)法(fa)。
基因(yin)表達(da)分析中的(de)應(ying)用(yong)
1.目(mu)標(biao)基因(yin)表達(da)量(liang)的(de)絕(jue)對定量
可(ke)以(yi)對目(mu)標(biao)基因(yin)的(de)表(biao)達(da)量(liang)進行(xing)絕(jue)對定量,即(ji)計(ji)算(suan)出(chu)特定(ding)基因(yin)在樣本中的(de)拷(kao)貝(bei)數(shu)。這對於(yu)研究基因(yin)功(gong)能(neng)、了解(jie)基因(yin)在生(sheng)物(wu)體(ti)中(zhong)的(de)作(zuo)用(yong)具有(you)重要意(yi)義。例(li)如,在疾病研究中(zhong),通(tong)過(guo)比(bi)較正常(chang)組(zu)織和病變組織(zhi)中目(mu)標(biao)基因(yin)的(de)表(biao)達(da)量(liang),可(ke)以(yi)揭(jie)示(shi)基因(yin)與疾(ji)病(bing)之間(jian)的(de)關(guan)系(xi)。
2.目(mu)標(biao)基因(yin)表達(da)量(liang)的(de)相對定量
還(hai)可(ke)以對目(mu)標(biao)基因(yin)的(de)表(biao)達(da)量(liang)進行(xing)相對定量,即(ji)比(bi)較不(bu)同樣(yang)本中目(mu)標(biao)基因(yin)的(de)表(biao)達(da)水平。這種方(fang)法(fa)通常采用(yong)內參基因(yin)(housekeepinggene)作(zuo)為參照,以消(xiao)除(chu)不同樣(yang)本間RNA提取質量(liang)、反轉(zhuan)錄(lu)效(xiao)率(lv)等(deng)因(yin)素的(de)影(ying)響(xiang)。相對定量方(fang)法(fa)在諸如(ru)疾病(bing)診(zhen)斷、藥物(wu)篩(shai)選(xuan)等(deng)領域具有(you)廣泛(fan)應(ying)用(yong)。
3.基因(yin)差異表(biao)達(da)分析
可以用(yong)於(yu)檢測(ce)基因(yin)在不同條(tiao)件下(如不(bu)同處理組(zu)、疾病(bing)與正常(chang)對照等(deng))的(de)差異表(biao)達(da)。通(tong)過(guo)對實驗組(zu)和對照組進行(xing)比(bi)較,可(ke)以(yi)篩(shai)選出(chu)差異表(biao)達(da)基因(yin),為後(hou)續的(de)研究提(ti)供(gong)目(mu)標(biao)基因(yin)。這種方(fang)法(fa)在功(gong)能(neng)基因(yin)組學(xue)、藥物(wu)研發等(deng)領域具有(you)重要價(jia)值(zhi)。