熒(ying)光定(ding)量(liang)檢(jian)測系(xi)統(tong)由熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀，實(shi)時熒(ying)光定(ding)量(liang)試劑(ji)，通(tong)用(yong)電腦，自動分析(xi)軟件等構成(cheng)。設(she)備(bei)由熒(ying)光定(ding)量(liang)系(xi)統(tong)和計算機組成，用(yong)來監測循(xun)環過(guo)程(cheng)的熒(ying)光。

　　與實(shi)時設(she)備(bei)相連的計算機收集熒(ying)光數據。數(shu)據通(tong)過(guo)開發(fa)的(de)實(shi)時分析(xi)軟件以圖(tu)表的形(xing)式(shi)顯示。原始數據(ju)被繪(hui)制(zhi)成(cheng)熒(ying)光強(qiang)度相對(dui)於(yu)循(xun)環數(shu)的(de)圖(tu)表。原始數據(ju)收集後(hou)可(ke)以開(kai)始分析(xi)。實(shi)時設(she)備(bei)的軟件能使收(shou)集到的(de)數據(ju)進(jin)行(xing)正常化處理(li)來彌(mi)補(bu)背(bei)景熒(ying)光的差(cha)異(yi)。正常(chang)化(hua)後(hou)可(ke)以設(she)定(ding)域(yu)值(zhi)水(shui)平(ping)，這(zhe)就(jiu)是(shi)分析(xi)熒(ying)光數據的(de)水(shui)平(ping)。樣品(pin)到達(da)域(yu)值(zhi)水(shui)平(ping)所經(jing)歷(li)的循(xun)環數(shu)稱(cheng)為(wei)Ct值(限(xian)制(zhi)點(dian)的循(xun)環數(shu))。域(yu)值(zhi)應(ying)設(she)定(ding)在使指(zhi)數期(qi)的(de)擴(kuo)增效率為(wei)大(da)，這(zhe)樣可(ke)以獲(huo)得(de)準確，可(ke)重復(fu)性的(de)數(shu)據。如(ru)果同(tong)時擴增的還有(you)標(biao)有(you)相(xiang)應濃度的標(biao)準品(pin)，線性回(hui)歸(gui)分析(xi)將(jiang)產(chan)生(sheng)壹(yi)條標(biao)準曲(qu)線，可(ke)以用(yong)來(lai)計算未(wei)知(zhi)樣品(pin)的(de)濃度。

　　所謂熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀技術，是(shi)指(zhi)在PCR反(fan)應體系(xi)中(zhong)加入熒(ying)光基(ji)因(yin)，利(li)用熒(ying)光信(xin)號累(lei)積(ji)實(shi)時監(jian)測整(zheng)個PCR進(jin)程(cheng)，後通(tong)過(guo)標(biao)準曲(qu)線對(dui)未(wei)知(zhi)模板進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)分析(xi)的方法(fa)。

　　Roche_Light Cycler 480II熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀已(yi)經應用於基(ji)礎科(ke)學(xue)研(yan)究、臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)、疾病研究及藥(yao)物研(yan)發(fa)等(deng)領(ling)域(yu)，主(zhu)要(yao)的(de)應(ying)用在以下(xia)方面(mian)：

　　1.DNA或RNA的定(ding)量(liang)分析(xi)。包括(kuo)病(bing)原(yuan)微生物(wu)或病毒(du)含量(liang)的檢(jian)測,轉(zhuan)基(ji)因(yin)動植物(wu)轉(zhuan)基(ji)因(yin)拷貝(bei)數的(de)檢(jian)測，RNAi基(ji)因(yin)失(shi)活率的(de)檢(jian)測等。

　　2.基(ji)因(yin)表達差(cha)異(yi)分析(xi)。例如(ru)比較經(jing)過(guo)不同(tong)處理(li)樣本(ben)之間特定(ding)基(ji)因(yin)的表達差(cha)異(yi)(如(ru)藥物處(chu)理(li)、物理(li)處理(li)、化學(xue)處(chu)理(li)等)，特定(ding)基(ji)因(yin)在不同(tong)時相的表達差(cha)異(yi)以及(ji)cDNA芯(xin)片(pian)或差(cha)顯結果的確證(zheng)

　　3.基(ji)因(yin)分型。例(li)如(ru)SNP檢(jian)測，甲(jia)基(ji)化檢(jian)測等。

　　隨(sui)著實(shi)時Roche_Light Cycler 480II熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀技術的推(tui)廣(guang)和(he)普及(ji)，該(gai)技術必(bi)然(ran)會(hui)得(de)到更(geng)廣泛(fan)的應(ying)用。