BD_FACSCalibur流式(shi)細胞儀(yi)在(zai)醫(yi)學應用非常(chang)廣(guang)泛，是壹種(zhong)能(neng)夠對(dui)細(xi)胞(bao)進(jin)行(xing)相關處理的(de)儀(yi)器，並(bing)且(qie)能(neng)夠(gou)對(dui)細(xi)胞(bao)進(jin)行(xing)必(bi)要的分析(xi)，所(suo)以在(zai)醫(yi)學的應用非(fei)常(chang)的(de)多。下面，小(xiao)編(bian)就來為(wei)大(da)家介(jie)紹壹下流式(shi)細(xi)胞儀(yi)應用(yong)在(zai)哪些(xie)方(fang)面(mian)。

　　1、DNA倍體(ti)分析(xi)

　　DNA分析(xi)是(shi)流式(shi)細胞儀(yi)初且(qie)是(shi)現在(zai)應用(yong)廣(guang)檢測項目(mu)。由於(yu)惡(e)性細胞DNA含(han)量(liang)通(tong)常與(yu)正(zheng)常(chang)細(xi)胞(bao)不同，存在(zai)異(yi)倍體(ti)細(xi)胞，所以現有很研(yan)究(jiu)評(ping)價(jia)異(yi)倍體(ti)細(xi)胞與(yu)腫瘤(liu)惡(e)性度及其預(yu)後(hou)的關系。DNA含(han)量(liang)檢測還可(ke)提供(gong)細(xi)胞周期方(fang)面(mian)的信(xin)息(xi)，這(zhe)在(zai)細胞(bao)生(sheng)物學中運(yun)用(yong)很廣(guang)泛。特別地(di)，它可(ke)表(biao)示出細(xi)胞(bao)毒性藥(yao)物對(dui)細(xi)胞(bao)作(zuo)用(yong)過(guo)程(cheng)。這(zhe)些(xie)DNA檢測還可(ke)與(yu)細胞(bao)表(biao)面(mian)標誌物標記(ji)同時(shi)進(jin)行(xing)，這(zhe)樣在(zai)細胞(bao)混合(he)培(pei)養中(zhong)，可通(tong)常追(zhui)蹤(zong)表(biao)達(da)特異(yi)標誌物的細(xi)胞(bao)顯示其生(sheng)長周期情況(kuang)。所有(you)方(fang)法(fa)都(dou)是基(ji)於(yu)染(ran)料能與(yu)核酸(suan)起特異(yi)的化(hua)學反(fan)應(ying)並(bing)發(fa)射出(chu)熒光，常用的染(ran)料(liao)為(wei)PI，DAPI。

　　2、細(xi)胞(bao)生(sheng)存能(neng)力(li)實驗

　　使(shi)用Heochest 33342染(ran)料與(yu)DNA特異(yi)性結(jie)合(he)，後(hou)因(yin)細(xi)胞(bao)活力(li)不同染料的(de)結(jie)合(he)程(cheng)度也各異(yi)，故可(ke)評(ping)估(gu)細胞的(de)活性(xing)度(du)。

　　3、計(ji)數外周血中檢測網(wang)織紅細胞(bao)

　　使(shi)用TO染(ran)料能(neng)夠特異(yi)性地(di)與(yu)RNA結合(he)，結(jie)合(he)系(xi)數高(gao)達(da)3000，故(gu)具(ju)有(you)很(hen)好的性(xing)價(jia)比(bi)。

　　4、外周血、骨髓(sui)采(cai)集物中CD34陽(yang)性(xing)幹細胞(bao)計數，臨床上用於骨髓(sui)移(yi)植(zhi)前(qian)幹細胞(bao)數理的(de)測定。使(shi)用標(biao)準ISHAG方(fang)案(an)，需(xu)要(yao)DNA或(huo)其他(ta)核(he)染(ran)料占(zhan)用FITC通(tong)道(dao)，PE標記(ji)CD34抗體(ti)，PE-CY5標(biao)記(ji)CD45抗體(ti)。

　　5、交叉(cha)淋(lin)巴細(xi)胞、粒(li)細(xi)胞毒實驗(yan)

　　BD_FACSCalibur流式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)檢測識(shi)別供(gong)體(ti)血(xue)清中免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)與(yu)受體(ti)粒(li)細(xi)胞之(zhi)間(jian)是(shi)否存(cun)在(zai)反(fan)應(ying)有(you)著(zhe)重(zhong)要臨床意義，因(yin)為(wei)這(zhe)種(zhong)反(fan)應(ying)會導致(zhi)移(yi)植(zhi)後發(fa)熱、移(yi)植(zhi)後肺(fei)損傷及免疫性(xing)粒(li)細(xi)胞缺(que)乏(fa)癥(zheng)。流式細胞(bao)儀(yi)可檢測全血樣本與(yu)血清(qing)孵(fu)育(yu)後(hou)粒(li)細(xi)胞上結合(he)的(de)人免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)。FITC標記(ji)人免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)、PE標(biao)記(ji)粒(li)細(xi)胞表(biao)面(mian)標誌物、PE-CY5標記(ji)HLA抗體(ti)。

　　6、血(xue)小板(ban)自(zi)身抗體(ti)檢測

　　血小(xiao)板(ban)自(zi)身抗體(ti)識(shi)別人血小(xiao)板(ban)抗原(yuan)，會引起各種(zhong)臨床相(xiang)關癥(zheng)狀(zhuang)，如(ru)新(xin)生(sheng)兒自(zi)免(mian)性血(xue)小(xiao)板(ban)減(jian)少癥(zheng)、輸(shu)血(xue)後紫(zi)癜(dian)、難治(zhi)性血(xue)小板(ban)減(jian)少。流式(shi)細(xi)胞(bao)可(ke)快(kuai)速準確地(di)檢測血小(xiao)板(ban)自(zi)身抗體(ti)。FITC標(biao)記(ji)抗人免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)、PE標(biao)記(ji)識(shi)別血(xue)小(xiao)板(ban)抗體(ti)。

　　7、移(yi)植(zhi)交叉(cha)配(pei)型

　　原(yuan)細胞毒實驗(yan)，主要用於(yu)避免(mian)移(yi)植(zhi)物超(chao)急性排(pai)拆反(fan)應(ying)。流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)用於(yu)監(jian)測T或(huo)B細胞(bao)是(shi)否受(shou)到(dao)受體(ti)血(xue)清中免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)攻擊，作(zuo)為(wei)HLA配(pei)型前(qian)的預(yu)實(shi)驗。流式細(xi)胞(bao)儀(yi)因(yin)其(qi)高(gao)性(xing)已(yi)成(cheng)為(wei)該(gai)領(ling)域(yu)內(nei)的(de)金(jin)標(biao)準(zhun)。FITC標記(ji)抗人免疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)抗體(ti)、PE標(biao)記(ji)識(shi)別T細(xi)胞(bao)CD3或(huo)B細胞(bao)CD29抗(kang)體(ti)。

　　8、檢測細胞(bao)經抗(kang)原或(huo)細胞(bao)有(you)絲(si)分裂(lie)刺(ci)激(ji)後活化(hua)效(xiao)應(ying)淋(lin)巴細(xi)胞早(zao)期活化(hua)指(zhi)標(biao)CD69可(ke)用(yong)來檢測免疫(yi)治(zhi)療效果。流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)使(shi)用三(san)色分析(xi)可(ke)監(jian)測淋(lin)巴細(xi)胞各(ge)亞群(qun)活化(hua)情況(kuang)：FITC標記(ji)的CD3抗(kang)體(ti)、PE標(biao)記(ji)的CD8抗(kang)體(ti)、PE-CY5標(biao)記(ji)的CD69抗(kang)體(ti)。

　　9、細(xi)胞增殖(zhi)狀(zhuang)態(tai)檢測

　　核增(zeng)殖(zhi)抗(kang)PCNA、Ki67、BrdUrd用於衡(heng)量(liang)細胞增殖(zhi)分裂(lie)狀(zhuang)況(kuang)，在(zai)評(ping)估(gu)腫瘤(liu)預(yu)後(hou)有重(zhong)要意義。為(wei)些(xie)標誌物的檢測壹般(ban)同細(xi)胞表(biao)面(mian)標誌物同時(shi)檢測。FITC標記(ji)PCNA或(huo)Ki67或(huo)BrdUrd，PE或(huo)（並(bing)）PE-CY5標記(ji)細胞(bao)表(biao)面(mian)標誌物。

　　10、染色(se)體(ti)分析(xi)

　　BD_FACSCalibur流(liu)式細(xi)胞儀(yi)染色(se)分析(xi)運(yun)用(yong)兩種特異(yi)性染(ran)料：Hoechest33258與(yu)核苷(gan)酸AT結(jie)合(he)；Chromomycin A3與(yu)GC相結(jie)合(he)。從而在(zai)雙參(can)數坐(zuo)標(biao)上根據染色體(ti)ATCG含(han)量的不同識(shi)別各(ge)種(zhong)染色(se)體(ti)。平時(shi)進(jin)行(xing)的染色體(ti)分析(xi)耗(hao)時(shi)且(qie)需(xu)要(yao)操(cao)作(zuo)者經驗(yan)，而用(yong)流式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)時(shi)可(ke)快(kuai)速地(di)識(shi)別出(chu)異(yi)常染(ran)色體(ti)，如(ru)加配(pei)分選系統(tong)可(ke)將這(zhe)些(xie)異(yi)常染(ran)色體(ti)分選出來作(zuo)進(jin)壹步(bu)分析(xi)。