關(guan)於(yu)BD _FACSAria流(liu)式(shi)細(xi)胞儀的(de)那些事(shi)兒!
BD _FACSAria流(liu)式(shi)細(xi)胞儀是(shi)對(dui)細(xi)胞進(jin)行(xing)自(zi)動分(fen)析和(he)分(fen)選的裝置(zhi)。它可(ke)以快(kuai)速(su)測(ce)量(liang)、存貯、顯(xian)示懸(xuan)浮在(zai)液體中(zhong)的(de)分散細(xi)胞的壹(yi)系列重(zhong)要(yao)的生(sheng)物(wu)物(wu)理、生物(wu)化學方(fang)面(mian)的特(te)征參(can)量(liang),並(bing)可(ke)以根(gen)據(ju)預選的參量(liang)範(fan)圍(wei)把的細(xi)胞亞群(qun)從中(zhong)分選出(chu)來(lai)。多(duo)數流(liu)式(shi)細(xi)胞計是(shi)壹種零分辨(bian)率(lv)的(de)儀(yi)器(qi),它只能(neng)測(ce)量壹個細(xi)胞的諸(zhu)如(ru)總核酸(suan)量,總(zong)蛋白量(liang)等(deng)指(zhi)標(biao),而不(bu)能(neng)鑒(jian)別和(he)測(ce)出某壹特(te)定部(bu)位(wei)的核(he)酸(suan)或蛋(dan)白的(de)多(duo)少(shao)。也就(jiu)是(shi)說,它(ta)的細(xi)節(jie) 分辨(bian)率(lv)為(wei)零。
操(cao)作流(liu)程(cheng)
1)打開(kai)電源(yuan),對(dui)系統(tong)進(jin)行(xing)預熱(re);
2)打開(kai)氣體閾(yu),調節 壓力(li),獲得適宜的液流速(su)度;開(kai)啟光源(yuan)冷卻系統(tong);
3)在(zai)樣(yang)品管中(zhong)加(jia)入(ru)去(qu)離子(zi)水(shui),沖洗(xi)液流的(de)噴嘴(zui)系統(tong);
4)利用校準標(biao)準樣品,調整儀器(qi),使在(zai)激光功(gong)率(lv)、光(guang)電(dian)倍(bei)增管電(dian)壓、放(fang)大器(qi)電路增益調定(ding)的(de)基礎上(shang),0和(he)90散射(she)的(de)熒(ying)光(guang)強度zui強,並要(yao)求變(bian)異(yi)系數(shu)為(wei)小(xiao);
5)選(xuan)定(ding)流(liu)速、測量細(xi)胞數、測(ce)量參(can)數等,在(zai)同(tong)樣的(de)工作條(tiao)件(jian)下測量樣(yang)品和(he)對(dui)照(zhao)樣(yang)品;同(tong)時選擇(ze)計算機屏上(shang)數據(ju)的(de)顯(xian)示方(fang)式(shi),從而能(neng)直觀(guan)掌握(wo)測量(liang)進(jin)程(cheng);
6)樣品測量完畢後(hou),再用(yong)去(qu)離子(zi)水(shui)沖洗(xi)液流系統(tong);
7)BD _FACSAria流(liu)式(shi)細(xi)胞儀因為(wei)實(shi)驗(yan)數(shu)據(ju)已(yi)存入(ru)計算機硬盤(有(you)的機器還(hai)備(bei)有(you)光盤系統(tong),存貯量(liang)更(geng)大(da)),因此(ci)可(ke)關閉(bi)氣體、測(ce)量裝置(zhi),而單(dan)獨(du)使用(yong)計算機進(jin)行(xing)數據(ju)處(chu)理(li);
8)將(jiang)所(suo)需結(jie)果打(da)印出來(lai)。
註意事(shi)項(xiang)
1)光(guang)電(dian)倍增(zeng)管要(yao)求穩定的(de)工(gong)作條(tiao)件(jian),暴(bao)露(lu)的(de)較強的光(guang)線(xian)下以後(hou),需要(yao)較長時間的“暗適應(ying)”以消(xiao)除(chu)或降(jiang)低部(bu)分(fen)暗電流本底才(cai)能(neng)工(gong)作;另(ling)外(wai)還(hai)要(yao)註意磁屏蔽;
2)光源(yuan)不(bu)得在短(duan)時間內(壹(yi)般(ban)要(yao)1h左右(you))關(guan)上(shang)又(you)打(da)開(kai);使用(yong)光源(yuan)必(bi)須預熱(re)並註意冷(leng)卻系統(tong)工(gong)作是(shi)否正(zheng)常;
3)液流系統(tong)必(bi)需隨時保持(chi)液流暢(chang)通(tong),避免氣(qi)泡(pao)栓(shuan)塞,所(suo)使用(yong)的鞘(qiao)流液使用(yong)前要(yao)經過過濾、消(xiao)毒(du);
4)註意根(gen)據(ju)測(ce)量對(dui)象(xiang)的(de)變(bian)換選(xuan)用(yong)合適的(de)濾片系統(tong)、放(fang)大器(qi)的類型(xing)等;
5)BD _FACSAria流式(shi)細(xi)胞儀特(te)別強調每次(ci)測(ce)量(liang)都(dou)需要(yao)對(dui)照(zhao)組(zu)。