在(zai)使(shi)用(yong)有(you)些(xie)廠家(jia)5通(tong)道(dao)的熒光定量儀(yi)時(shi)，為了確保實(shi)驗結果的精確性(xing)和(he)準(zhun)確性(xing)都要(yao)在(zai)實(shi)驗中(zhong)使用ROX（壹(yi)種熒光染料(liao)）或(huo)專(zhuan)用的Referencedye，這些(xie)熒光染(ran)料(liao)都(dou)必(bi)須單獨(du)使用(yong)壹個(ge)檢測通(tong)道(dao)。這樣以來，真(zhen)正能檢測多重(zhong)PCR熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)的有效(xiao)通(tong)道(dao)只(zhi)有4個(ge)，而(er)且(qie)使用(yong)校(xiao)正染料(liao)可(ke)能會增(zeng)加(jia)後(hou)期(qi)的使用成本(ben)。有(you)的熒光定量PCR的檢測通(tong)道(dao)是(shi)只為自(zi)已(yi)廠家(jia)的專(zhuan)用的熒光染料(liao)或(huo)試(shi)劑(ji)開(kai)放的，有效(xiao)檢測通(tong)道(dao)也(ye)絕非像宣(xuan)傳(chuan)資料(liao)中(zhong)宣(xuan)稱(cheng)的那(na)麽多。在(zai)購(gou)買(mai)前(qian)確認熒(ying)光(guang)定量PCR儀(yi)器的有效(xiao)檢測通(tong)道(dao)尤(you)為重(zhong)要(yao)，不(bu)能(neng)單單只(zhi)聽(ting)宣(xuan)傳(chuan)。

　　

　　考慮(lv)多重(zhong)ABI_7500熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR儀的通(tong)道(dao)數(shu)的時候也(ye)應(ying)該(gai)從(cong)實(shi)驗室(shi)實(shi)際情(qing)況出發(fa)，多重(zhong)PCR並非(fei)人(ren)人(ren)適(shi)用、人(ren)人(ren)可(ke)用，因為(wei)多重(zhong)PCR必(bi)須要對退火(huo)溫(wen)度進行(xing)優(you)化(hua)，在引(yin)物設(she)計的時候就可(ke)能開始考(kao)慮(lv)能(neng)不(bu)能(neng)放在壹個(ge)反(fan)應(ying)體(ti)系內(nei)進行(xing)反(fan)應(ying)，不(bu)同(tong)的反應(ying)需要(yao)的退火溫度不(bu)同(tong)，不(bu)合(he)適的退火溫度會降低(di)擴增(zeng)效(xiao)率(lv)，放大(da)非(fei)特異性(xing)擴增(zeng)，甚(shen)至(zhi)擴增(zeng)不(bu)出(chu)來，它使實(shi)驗指(zhi)數倍的復雜(za)化了。臨床上(shang)因(yin)為有(you)試劑(ji)廠(chang)家(jia)專(zhuan)門(men)針(zhen)對某些(xie)疾(ji)病開(kai)發(fa)研制的多重(zhong)檢測試(shi)劑(ji)盒，才需要(yao)用到3、4、5通(tong)道(dao)的檢測；科(ke)研(yan)用(yong)的熒光定量因(yin)為(wei)設計探針(zhen)麻煩(fan)，基(ji)本(ben)上(shang)都(dou)用染料(liao)法，基本(ben)上(shang)單通(tong)道(dao)就能滿(man)足(zu)。