Bio-Rad_PTC-200 PCR儀(yi)可(ke)以(yi)根(gen)據不同的(de)DNA的(de)片(pian)段及(ji)其(qi)引(yin)物(wu)，設計(ji)不同的(de)擴增(zeng)條(tiao)件，從而(er)實(shi)現樣(yang)本(ben)DNA在(zai)Taq酶的(de)作用下(xia)達(da)到指數性(xing)的(de)增(zeng)長(chang)。廣(guang)泛應用於序列測定、遺傳(chuan)分析(xi)、醫(yi)療診(zhen)斷等(deng)樣(yang)品的(de)前處(chu)理。
PCR（聚(ju)合(he)酶鏈式反(fan)應）是(shi)利(li)用DNA在(zai)體外(wai)攝(she)氏(shi)95°高(gao)溫時變性會(hui)變(bian)成(cheng)單鏈，低溫（經(jing)常是(shi)60°C左右）時引物與單鏈按堿基(ji)互(hu)補(bu)配對的(de)原則結(jie)合(he)，再調(tiao)溫度至(zhi)DNA聚(ju)合(he)酶最適反(fan)應溫度（72°C左右），DNA聚(ju)合(he)酶沿著(zhe)磷(lin)酸(suan)到五碳糖(5'-3')的(de)方向(xiang)合成(cheng)互(hu)補(bu)鏈。PCR儀(yi)實(shi)際(ji)就是(shi)壹(yi)個(ge)溫控(kong)設備(bei)，能(neng)在(zai)95℃，55℃，72℃之間(jian)很好地(di)進行溫度控(kong)制(zhi)。PCR擴增(zeng)儀(yi)又(you)稱(cheng)為PCR基(ji)因(yin)擴增(zeng)儀(yi)、PCR核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)儀(yi)、聚(ju)合(he)酶鏈反應核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)儀(yi)，是(shi)利(li)用PCR(Polymerasechainreaction，聚(ju)合(he)酶鏈反應)技(ji)術對特(te)定DNA擴(kuo)增(zeng)的(de)壹(yi)種(zhong)儀(yi)器(qi)設備(bei)，被廣(guang)泛(fan)運(yun)用於醫(yi)學、生物(wu)學實(shi)驗室(shi)中(zhong)，例(li)如用於判斷(duan)檢(jian)體中(zhong)是(shi)否(fou)會(hui)表(biao)現某(mou)遺傳(chuan)疾(ji)病(bing)的(de)圖(tu)譜、傳(chuan)染(ran)病(bing)的(de)診(zhen)斷、基(ji)因(yin)復(fu)制(zhi)以及(ji)親子鑒(jian)定等(deng)。
Bio-Rad_PTC-200 PCR儀(yi)反(fan)應步(bu)驟：
分別是(shi)：1.Denaturation2.Annealingofprimers,3.Extensionofprimers。所謂(wei)Denaturing乃(nai)是(shi)將(jiang)DNA加熱(至(zhi)90~95℃)變性(xing)，將(jiang)雙(shuang)股(gu)的(de)DNA加熱後轉為單股DNA以(yi)做(zuo)為復(fu)制(zhi)的(de)模板.而(er)Annealing則是(shi)令(ling)Primers於壹(yi)定的(de)溫度下(xia)(冷卻(que)至(zhi)55~60℃)附(fu)著(zhe)於模板DNA兩(liang)端(duan)。最(zui)後在(zai)DNA聚(ju)合(he)酶e.g.Taq-polymerase的(de)作用下(xia)(加熱至(zhi)70~75℃)進行引物(wu)的(de)延(yan)長(chang)Extensionofprimers及(ji)另壹(yi)股(gu)的(de)合成(cheng)。
PCR的(de)最早(zao)設想核酸(suan)研(yan)究(jiu)已有100多年的(de)歷史，二(er)十(shi)世紀60年代(dai)末、70年代(dai)初(chu)人(ren)們致(zhi)力(li)於研(yan)究(jiu)基(ji)因(yin)的(de)體外(wai)分離(li)技術(shu)，Korana於1971年最早(zao)提(ti)出核酸(suan)體外(wai)擴(kuo)增(zeng)的(de)設想:"經(jing)過DNA變(bian)性，與合適的(de)引物(wu)雜(za)交(jiao)，用DNA聚(ju)合(he)酶延(yan)伸(shen)引物，並(bing)不斷重(zhong)復(fu)該過程(cheng)便可(ke)克隆tRNA基(ji)因(yin)"。
PCR技術(shu)的(de)本(ben)質是(shi)體外(wai)核酸(suan)擴(kuo)增(zeng)，加熱使雙(shuang)鏈DNA解開螺(luo)旋，在(zai)退(tui)火溫度條(tiao)件(jian)下(xia)引(yin)物(wu)同模板DNA雜(za)交，在(zai)TaqDNA聚(ju)合(he)酶，dNTPs，Mg2+和合適pH緩沖液存(cun)在(zai)條件(jian)下延(yan)伸(shen)引物，重(zhong)復(fu)“變性(xing)→退(tui)火→引(yin)物延(yan)伸(shen)”過程(cheng)至(zhi)25～40個(ge)循(xun)環(huan)，呈(cheng)指數級擴大(da)待測樣(yang)本(ben)中(zhong)的(de)核酸(suan)拷(kao)貝數(shu)。
