壹、細胞周(zhou)期的(de)基(ji)本(ben)概念(nian)

 

　　細胞周(zhou)期是(shi)指(zhi)細胞從(cong)壹次(ci)分(fen)裂(lie)結(jie)束到(dao)下(xia)壹次(ci)分(fen)裂(lie)開(kai)始的過(guo)程，通(tong)常包括四個(ge)階段：G1期、S期(qi)、G2期(qi)和M期。在G1期，細胞進(jin)行(xing)生(sheng)長(chang)和準(zhun)備進(jin)入DNA合成(cheng)階段；S期是(shi)DNA合(he)成(cheng)的階段，細胞通(tong)過(guo)復制(zhi)DNA為(wei)下壹輪(lun)分(fen)裂(lie)做好(hao)準(zhun)備；G2期是細胞為(wei)進(jin)入有絲(si)分(fen)裂(lie)做進(jin)壹步準(zhun)備的階段；M期則(ze)為(wei)細胞分(fen)裂(lie)的實(shi)際過(guo)程，包括有(you)絲(si)分(fen)裂(lie)（Mitosis）。

 

　　二、流(liu)式細胞術(shu)的基(ji)本(ben)原(yuan)理

 

　　流(liu)式細胞術(shu)通(tong)過(guo)使用(yong)激光(guang)束照(zhao)射(she)懸浮液中(zhong)的(de)單個細胞，激發(fa)細胞內(nei)部的(de)熒(ying)光(guang)標(biao)記物(wu)發(fa)光(guang)，然(ran)後通(tong)過(guo)探測器(qi)捕捉這些(xie)光(guang)信號，進(jin)而獲(huo)得細胞的(de)多種(zhong)特(te)征(zheng)信息(xi)，包括細胞大(da)小、粒度(du)和表面(mian)標(biao)記物(wu)等(deng)。流(liu)式細胞儀能(neng)夠同時測量多個(ge)參數(shu)，通(tong)過(guo)分(fen)析細胞的(de)DNA含量(liang)，幫(bang)助(zhu)研(yan)究(jiu)者(zhe)評估(gu)細胞周(zhou)期的(de)不(bu)同階段。

 

　　三(san)、優勢(shi)

 

　　BD_Accuri_C6流(liu)式細胞儀是(shi)壹種(zhong)集成(cheng)度(du)較(jiao)高(gao)的(de)儀器(qi)，其(qi)小巧的(de)體(ti)積(ji)和易(yi)於(yu)操(cao)作(zuo)的界面(mian)使其(qi)廣泛(fan)應用(yong)於(yu)各種研究(jiu)領(ling)域。該儀器(qi)配備(bei)了多(duo)個(ge)激光(guang)源，能夠同時檢(jian)測細胞內(nei)多個(ge)參數(shu)，如(ru)DNA含(han)量(liang)、細胞表(biao)面(mian)標(biao)記物(wu)以(yi)及細胞內(nei)蛋白(bai)等(deng)。

 

　　與傳統流(liu)式細胞儀相比(bi)，BDAccuriC6具(ju)備以(yi)下(xia)顯(xian)著(zhu)優勢(shi)：

 

　　1.高(gao)靈敏度(du)和高(gao)精(jing)度(du)：BDAccuriC6的(de)精(jing)確熒光(guang)檢(jian)測系(xi)統能(neng)夠提(ti)供高(gao)靈敏度(du)和高(gao)分(fen)辨(bian)率(lv)的(de)細胞周(zhou)期分(fen)析。

 

　　2.簡便的操作(zuo)界面(mian)：AccuriC6配備(bei)直(zhi)觀(guan)易(yi)懂的(de)軟(ruan)件(jian)，使(shi)操(cao)作(zuo)人(ren)員(yuan)能夠輕松完成細胞周(zhou)期分(fen)析。

 

　　3.多參數(shu)分(fen)析能力：支(zhi)持多(duo)種標(biao)記物(wu)的同時分(fen)析，幫助研究(jiu)人(ren)員(yuan)了解細胞周(zhou)期與其(qi)他細胞特(te)征(zheng)之(zhi)間(jian)的關系(xi)。

 

　　四、細胞周(zhou)期分(fen)析的實(shi)驗流(liu)程

 

　　1.樣(yang)品準(zhun)備：首先(xian)，選擇適(shi)當的細胞系(xi)或(huo)樣(yang)品(pin)，將(jiang)其(qi)培(pei)養(yang)至對數生(sheng)長(chang)期。之後，通(tong)過(guo)胰(yi)蛋(dan)白酶消(xiao)化或(huo)離(li)心(xin)等(deng)方式，得到(dao)單細胞懸液。為(wei)了進(jin)行(xing)細胞周(zhou)期分(fen)析，通(tong)常需(xu)要使(shi)用(yong)DNA染(ran)料，如(ru)PI（碘(dian)化丙(bing)啶）或(huo)DAPI（4',6-diamidino-2-phenylindole），這類(lei)染(ran)料能(neng)夠與DNA結(jie)合並(bing)在激光(guang)照(zhao)射(she)下(xia)發(fa)出(chu)熒(ying)光(guang)。

 

　　2.細胞染(ran)色：將(jiang)細胞懸液加入染(ran)料溶(rong)液中(zhong)，在(zai)室溫(wen)下(xia)避光(guang)孵(fu)育(yu)壹段時間(jian)。染(ran)料與細胞內(nei)的DNA結(jie)合，能(neng)夠使細胞在(zai)流(liu)式細胞儀中(zhong)形(xing)成不同的熒(ying)光(guang)信號，從(cong)而區(qu)分(fen)細胞處(chu)於不(bu)同的周(zhou)期(qi)階段。

 

　　3.流(liu)式細胞儀分(fen)析：將(jiang)染(ran)色後的細胞樣(yang)品加(jia)載(zai)到(dao)BDAccuriC6流(liu)式細胞儀上(shang)，通(tong)過(guo)激光(guang)照(zhao)射(she)激發(fa)染(ran)料，儀器(qi)通(tong)過(guo)熒光探(tan)測器(qi)獲(huo)取(qu)細胞的(de)熒光(guang)信號。BDAccuriC6的分(fen)析軟(ruan)件(jian)能(neng)夠根據(ju)DNA含量(liang)對細胞進(jin)行(xing)分(fen)類(lei)，從(cong)而繪制(zhi)細胞周(zhou)期分(fen)布(bu)圖。

 

　　4.數(shu)據(ju)分(fen)析：細胞周(zhou)期分(fen)析結(jie)果通(tong)常以(yi)DNA含(han)量(liang)與細胞數(shu)目(mu)之(zhi)間(jian)的(de)關系(xi)為(wei)基(ji)礎，繪制(zhi)出DNA含量的(de)分(fen)布(bu)圖。通(tong)過(guo)分(fen)析該圖，研(yan)究(jiu)人(ren)員(yuan)能夠估算細胞處(chu)於G1期(qi)、S期(qi)、G2/M期(qi)的比(bi)例(li)，以(yi)及細胞周(zhou)期是(shi)否(fou)發(fa)生(sheng)了異(yi)常（如(ru)G1期(qi)延(yan)長(chang)、S期縮(suo)短等(deng)）。

 

　　五(wu)、應用(yong)領(ling)域

 

　　1.腫(zhong)瘤學(xue)研究(jiu)：在腫(zhong)瘤研(yan)究(jiu)中(zhong)，細胞周(zhou)期分(fen)析有助於了解癌細胞的(de)增殖特(te)性。腫(zhong)瘤細胞常常存(cun)在(zai)細胞周(zhou)期的(de)紊亂，流(liu)式細胞術(shu)能夠幫助(zhu)研究(jiu)人(ren)員(yuan)評估(gu)抗(kang)癌藥物(wu)對癌細胞周(zhou)期的(de)影(ying)響(xiang)。

 

　　2.藥物(wu)篩(shai)選：通(tong)過(guo)分(fen)析藥物(wu)處(chu)理前(qian)後細胞周(zhou)期的(de)變化，研(yan)究(jiu)人(ren)員(yuan)能夠篩(shai)選出具(ju)有細胞周(zhou)期調節(jie)作(zuo)用(yong)的(de)藥物(wu)。

 

　　3.幹細胞研(yan)究(jiu)：細胞周(zhou)期分(fen)析對於幹細胞的(de)增殖與分(fen)化具(ju)有重(zhong)要(yao)意(yi)義，幫助研究(jiu)人(ren)員(yuan)評估(gu)不同條件(jian)下(xia)幹細胞的(de)生(sheng)長(chang)與分(fen)化特(te)性。