熒光定(ding)量(liang)PCR儀是(shi)壹種利(li)用(yong)特定(ding)熒(ying)光信號(hao)來檢(jian)測(ce)、定(ding)量(liang)PCR反應產(chan)物的(de)設(she)備。和傳(chuan)統PCR相比，熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀具(ju)有(you)高靈敏(min)度、準(zhun)確(que)性(xing)、快速(su)性(xing)和(he)高(gao)通(tong)量等優點，廣(guang)泛用(yong)於基(ji)礎和應用(yong)生物學(xue)研(yan)究(jiu)、臨床(chuang)醫(yi)學診(zhen)斷以及(ji)環境監(jian)測(ce)等領域(yu)。
熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀的工作(zuo)原理(li)是(shi)利(li)用(yong)熒光(guang)染料來判(pan)斷PCR反應(ying)產(chan)物的(de)數(shu)量(liang)。PCR反應過程中(zhong)，特(te)定(ding)的(de)熒光探針(zhen)會(hui)結合(he)到(dao)PCR產(chan)物上(shang)，並在PCR反(fan)應過程中(zhong)放(fang)出(chu)熒光(guang)信(xin)號(hao)。熒(ying)光(guang)強(qiang)度隨(sui)PCR產(chan)物數(shu)量(liang)的增加(jia)而增強(qiang)，可(ke)以通過檢測(ce)這(zhe)種熒(ying)光信(xin)號(hao)來定(ding)量(liang)PCR產(chan)物的(de)數(shu)量(liang)。為了保(bao)證熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR實驗的準(zhun)確(que)性(xing)和可(ke)靠性，使用(yong)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀需要(yao)滿足(zu)以下(xia)要(yao)求：
1.選(xuan)擇(ze)合(he)適的(de)熒光染料：不(bu)同(tong)的熒光(guang)染料(liao)適用(yong)於不(bu)同(tong)的PCR反應(ying)體(ti)系(xi)，應(ying)根據實驗需要(yao)選(xuan)擇(ze)合(he)適的(de)熒光染料。
2.始終(zhong)保持(chi)PCR儀(yi)幹(gan)凈：使(shi)用(yong)前應(ying)清(qing)潔PCR儀內(nei)部(bu)，避免汙染(ran)和(he)幹(gan)擾實驗結果。
3.合(he)理設(she)置(zhi)PCR反應條(tiao)件(jian)：包括(kuo)反應(ying)體(ti)系(xi)組(zu)成(cheng)、PCR循(xun)環程序、熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)條(tiao)件(jian)等，應根據實驗設(she)計和(he)要(yao)求選(xuan)擇(ze)最佳的反應(ying)條(tiao)件(jian)。
4.對(dui)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR結果進(jin)行(xing)質量控制：在(zai)進(jin)行(xing)PCR反(fan)應(ying)前(qian)，應檢(jian)查PCR反(fan)應體(ti)系(xi)的(de)光(guang)學(xue)性(xing)能，以確保(bao)熒光(guang)信(xin)號(hao)的(de)精(jing)準(zhun)度和(he)可(ke)靠性。
5.進(jin)行(xing)數(shu)據分(fen)析和(he)解釋(shi)：合(he)理分(fen)析和(he)解釋(shi)熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR結果，需要(yao)充(chong)分(fen)了解(jie)PCR技術的原理和(he)實驗條(tiao)件(jian)。
